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想要合適的靜態軸向壓縮柱,就該用心去選擇

發布時間:2021-05-31      點擊次數:483
  靜態軸向壓縮柱具有的填裝固定相手段,使用于真空軸吸和床層壓縮相結合的填裝技術。至此將固定相或勻漿液吸入柱中,然后緩慢加壓,柱床不同柱徑比可設定不同壓力顯示,將柱床填實,可避免固定相顆料破碎的情況,很容易將半制備柱向制備柱放大,操作非常方便。
  那么,如何選擇一款合適的制備柱呢?
  首先:選擇合適的填料。
  越小的粒徑具有越高的柱效,但是價格更高,并且帶來更高的柱壓,要求設備的硬件具備更高的壓力耐受性。在被測組分的色譜峰與其它色譜峰非??拷鼤r,就需要更高的柱效,此時較小粒徑的色譜填料就顯得非常有用。相反,越大的粒徑則柱效越低,但價格也相對較低,同時對設備的要求也不高(10um較常用)。
  第二步:針對蛋白質、多肽類等物質,選擇合適的鍵合相、孔徑。
  靜態軸向壓縮柱由目前市場需求來看,蛋白質、多肽等類的物質分離純化十分普遍,其中以C18、C8、C4的鍵合相居多,如何根據物質分子量的大小,來選擇合適的含碳量和粒徑是個非常重要的問題。而相同粒徑不同孔徑的效果也有不同,如120A、300A等,因此,孔徑的選擇也十分重要。
  第三步:選擇合適的柱管。
  樣品的上樣要與色譜柱的交叉截面面積相對稱,要選擇色譜柱的內徑要適合于樣品的上樣量(21.2較常用)。越長的色譜柱具有越高的柱效和更高的樣品承載量,但是柱壓將會更高,同時分離時間可能會更長(250mm較常用)。
  第四步:確定合適的流速和上樣量
  制備型色譜柱的流速:一般與直徑的平方成正比。舉例:4.6mm分析柱流速設為為1mL/min,10mm制備型色譜柱可以為1*(10/4.6)2,約為4.7ml/min。
  上樣量的多少即超載多少,這是為了節約溶劑、節省時間、增加柱子的使用率,因此上樣量都是超載的。但并不是超載越多就越好,因為超載越多、塔板數越低。靜態軸向壓縮柱一般情況下,是否超載過量,可以以柱效下降一半為標準,在此基礎上再超載,所得到的物質純度就會受到影響,反而達不到目的。
 

 

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