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色譜柱損耗率高?五大維護關鍵問題必看!

發布時間:2022-02-16      點擊次數:166
   于1950年代。隨著填料和填料技術的發展,色譜柱技術越來越成熟,其功能也越來越完善。已廣泛應用于生命科學、環保、材料、食品、藥物開發等領域。
  立柱安裝方向
  色譜柱安裝應按同一方向連接,需按照上的方向指示連接,盡量避免接反!
  常見的連接有兩個主要問題。安裝時,延長管接頭長度過長,使螺紋變淺,導致密封不良和泄漏,進一步造成基線漂移或響應降低;反之,管道前段會出現死體積,導致峰形變寬,靈敏度降低。
  理想的接頭連接應具有以下特點:管道與界面之間無死體積;始終避免在超高壓和高溫下泄漏;優異的長期穩定性,防止管道滑動;使用方便。
  管道的選擇也很重要。分析液相系統常用的規格是內徑為0.12和0.17mm的管道。更換管道時,首先確認當前管道規格,更換內徑和長度相同的管道,否則更換前后的結果會不一致,因為管道的體積會影響柱外體積系統,從而影響峰形和保留時間。
  反相柱活化平衡
  1)首先,用甲醇或乙腈洗滌大約20個柱體積。
  2)如果流動相含有緩沖鹽,使用與流動相中初始比例相同比例的超純水和有機相沖洗過渡液約20次柱體積,然后平衡并用含有緩沖鹽的流動相沖洗大約柱體積的20倍或更多。
  3)如果流動相不含緩沖鹽,可以直接用流動相平衡柱子,大約柱體積的20倍或更多。
  4)當基線和壓力穩定后,根據連續注射結果的再現測試確定平衡是否完全平衡。如果不夠,可以延長流動相的平衡時間。
  反相柱沖洗并保存
  1)用50:50甲醇或乙腈與水的混合溶液沖洗20-30倍柱體積;
  2)用純甲醇或乙腈沖洗20-30倍柱體積;
  3)存放前將柱端接頭上的塞子密封嚴密,以防止填料變干。
  反相柱清洗和再生
  清洗或反沖反相時,用至少30倍柱體積的下列溶劑沖洗:
  將與檢測器斷開,留出末端的管線,放入接液的燒杯中,用不含緩沖鹽的流動相(水/有機相)沖洗,然后用100%有機相(甲醇和乙腈)檢查壓力是否恢復正常。如果沒有,請繼續下一步。
  如果壓力沒有恢復正常,丟棄或考慮使用更強的條件進行清潔:75%乙腈/25%異丙醇、100%異丙醇、100%二氯甲烷、100%己烷。
  值得注意的是,無論使用正己烷還是二氯甲烷,使用前或恢復使用反相流動相前都需要用異丙醇沖洗。
  關于反吹
  盡管不應輕易反吹,但當明確知道超壓是由顆粒堵塞篩板或柱頭污染補救措施引起時,反吹是有效的。反吹可以快速沖洗掉顆粒物。此外,它可以快速沖出柱頂以強力吸附污染物。反吹后,仍處于正向連接狀態。但是,反吹也會帶來負面影響。例如,它可能會導致柱床松動、保留時間的變化以及小粒徑的反吹可能會導致填充流動。等待。
  其中,可反吹的包括:粒徑大于2um(2.7、3、3.5、4、5μm等);不能反吹的有:粒徑小于2um(1.8μmRRHD/RRHT;1.9μmPoroshell)。
  使用中的常見問題
  色譜柱使用中常見的問題包括pH值、溫度、溶劑耐受性、壓力、樣品等。的使用條件不應超過制造商推薦的范圍,包括壓力、pH范圍、水相耐受性、柱溫等。當測試條件接近使用范圍的極限值時,生活會受到影響。
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